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        人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒樣本處理及操作要求2016-09-01

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        將來商城人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒
        實驗前樣本的處理方法在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天就進行檢測的樣本,及時儲存在4℃備用。對于隔天再檢測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃備用,有條件的,最好-70℃凍存備用。標本應避免反復凍融。

        液體類標本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養上清等。

        1.血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘后、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成、應再次離心。 

        2.血漿:應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑、混合10-20分鐘后、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。  

        3.尿液:用無菌管收集、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成、應再次離心、胸腹水、腦脊液參照此實行。  

        4.細胞培養上清:檢測分泌性的成份時、用無菌管收集、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清。  

        5.培養細胞:檢測細胞內的成份時、用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液、細胞濃度達到100萬/ml左右、通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑、以使細胞破壞并放出細胞內成份、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。  

        6.組織標本:切割標本后、稱取重量、加入一定量的PBS、PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用、標本融化后仍然保持2-8℃的溫度、加入一定量的PBS(PH7.4)、或組織蛋白萃取試劑、用手工或勻漿器將標本勻漿化、離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)、仔細收集上清、分裝后一份待檢測、其余冷凍備用。

        人巨噬細胞集落刺激因子試劑盒產品介紹

        人巨噬細胞集落刺激因子試劑盒操作
        人巨噬細胞集落刺激因子試劑盒使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
        標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。局限6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到精確的結果。


        人巨噬細胞集落刺激因子試劑盒性能
        1、靈敏度:最小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為
        1.0 pg/mL。
        2、特異性:不與其它細胞因子反應。
        3、重復性:板內、板間變異系數均小于10%。


        文章關鍵詞:人巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA試劑盒,試劑盒操作方法,操作注意事項

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        商品編號 產品名稱 實驗方法 靈敏度
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